從購買回來暫養14天的草魚中,選取540 尾健康草魚(初始體重:226.48±0.68 g/尾)隨機分入18 個網箱,隨機以3個網箱為一個處理,共6個處理。每個網箱為一個重復數。以不同添加量的蝎源性抗菌肽的試驗飼糧分別飼喂,蝎源性抗菌肽由深圳市圣西馬生物技術有限公司提供。
如表1所示,處理1到6的蝎源性抗菌肽添加量分別為0.0、0.6、1.2、1.8、2.4、3.0mg/kg飼糧。
表1:試驗設計
蝎源性抗菌肽對生長中期草魚免疫分子的影響
魚類腸道免疫分子活力或含量能反映腸道的免疫功能。
蝎源性抗菌肽對生長中期草魚前腸、中腸和后腸免疫分子活力或含量影響見下表2、3、4。
--- 前 腸 ---
免疫分子LZ活力和IgM含量隨著飼糧中蝎源性抗菌肽水平增加而顯著上升,當蝎源性抗菌肽水平分別上升至12mg/kg和18mg/kg時達到最大值,之后顯著下降(P<0.05)。
C3和C4含量隨蝎源性抗菌肽添加水平的增加而增加,當蝎源性抗菌肽水平達到1.8mg/kg時達到最大值, 之后逐漸下降,到達3.0mg/kg時顯著下降(P<0.05)。
表2:IsCT對生長中期草魚嗜水氣單胞桿菌感染后前腸道免疫分子的作用
--- 中 腸 ---
免疫分子Lz活力和IgM含量隨著飼糧中蝎源性抗菌肽水平增加而顯著上升(P<0.05),當蝎源性抗菌肽水平分別上升至18mg/kg時達到最大值,之后顯著下降(P<0.05)。
C3和C4含量隨蝎源性抗菌肽添加水平的增加而增加,當蝎源性抗菌肽水平達到1.8mg/kg時達到最大值,2.4mg/kg時顯著下降(P<0.05)。
表3:IsCT對生長中期草魚嗜水氣單胞桿菌感染后中腸道免疫分子的作用
--- 后 腸 ---
免疫分子LZ活力和IgM含量隨著飼糧中蝎源性抗菌肽水平增加而顯著上升(P<0.05),當蝎源性抗菌肽水平分別上升至1.2mg/kg和1.8mg/kg時達到最大值,達到24mg/kg時顯著下降(P<0.05)。
C3和C4含量隨蝎源性抗菌肽添加水平的增加而增加,當蝎源性抗菌肽水平達到1.8mg/kg時達到最大值,之后顯著下降(P<0.05)。
表4:IsCT對生長中期草魚嗜水氣單胞桿菌感染后后腸道免疫分子的作用
這些結果表明,適宜水平的蝎源性抗菌肽提高了生長中期草魚腸道的免疫能力。
蝎源性抗菌肽對生長中期草魚內源性抗菌肽的影響
魚類內源抗菌肽具有廣謙抗菌能力,在非特異性免疫反應中發揮重要作用。
目前在魚上已發現的抗菌肽包括Hepcidin和和β-defensin-1等。蝎源性抗菌肽對生長中期草魚前腸、中腸和后腸內源抗菌defensin、Hepcidin、LEAP-2A、LEAP-2B和 Mucin2的mRNA相對表達量的影響見下表5、6、7。
--- 前 腸 ---
內源抗菌defensin-1、Hepcidin、LEAP-2A、LEAP-2B 和Mucin-2的mRNA相對水平隨蝎源性抗菌肽的水平增加而增加,當分別上升至1.2mg/kg、1.8mg/kg、1.8mg/kg和1.8mg/kg時達到最大值,之后逐漸下降達到3.0mg/kg時下降顯著(P<0.05)。
表5:IsCT對生長中期草魚嗜水氣單胞桿菌感染后前腸中內源抗菌肽基因表達的作用
--- 中 腸 ---
0.6~2.4mg/kg蝎源抗菌肽添加組的Hepcidin mRNA 水平顯著高于未添加組和最高劑量組(P<0.05)。
β-defensin-1、LEAP-2A、LEAP-2B和Mucin-2的mRNA相對表達量隨蝎源性抗菌肽的水平增加而增加,當分別上升至1.8mg/kg、1.2mg/kg、1.2mg/kg和1.2mg/kg時達到最大值(P<0.05),之后逐漸下降。
表6:IsCT對生長中期草魚嗜水氣單胞桿菌感染后中腸中內源抗菌肽基因表達的作用
--- 后 腸 ---
0.6~2.4mg/kg蝎源抗菌肽添加組的Hepcidin mRNA水平顯著高于未添加組和最高劑量組(P<0.05)。
1.8mg/kg蝎源抗菌肽添加組的β-defensin-1 mRNA水平顯著高于未添加組(P<0.05)。
LEAP-2A、LEAP-2B和Mucin-2的mRNA相對表達量隨蝎源性抗菌肽的水平增加而增加,當分別上升至1.2 mg/kg時達到最大值(P<0.05),之后逐漸下降。
表7:IsCT對生長中期草魚嗜水氣單胞桿菌感染后后腸中內源抗菌肽基因表達的作用
這些結果表明蝎源性抗菌肽通過增強草魚腸道的抗菌能力,改善草魚腸道免疫功能。
- 總 結 -
蝎源性抗菌肽可能通過以下兩種方式提高草魚腸道免疫功能:
1、提高相關免疫分子的活性;
2、提高內源性抗菌肽的表達。
以后,再談到抗菌肽提高草魚免疫功能的原理時,以上兩點就是最新論證的依據啦!
注:以上內容截取自期刊論文:《蝎源性抗菌肽對生長中期草魚的生產性能及腸道健康的調控作用》,該論文發表在ScienceDirect數據庫《Aquaculture》期刊上。
論文鏈接:https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0044848621002477